ANÁLISE DA ESTRUTURA MICROSCÓPICA DA FEOFÍCEA LOBOPHORA VARIEGATA E CARACTERIZAÇÃO FÍSICO-QUÍMICA DE POLISSACARÍDEOS SULFATADOS EXTRAÍDOS DE PAREDE CELULAR
Resumo
Lobophora variegata é uma feofícea rica em polissacarídeos sulfatados (PSs) de parede celular. Objetivou-se analisar a estrutura microscópica e caracterizar físico-quimicamente PSs extraídos de parede celular. A alga coletada na praia do Pacheco, Caucaia – CE, foi conduzida em saco plástico ao laboratório de Bioquímica Marinha para estudo. Após lavagem com água destilada, foram preparados cortes histológicos para observação microscópica, com aumento de 400 vezes. A extração dos PSs foi realizada com papaína (3h; 60°C), a partir de 5 g de tecido desidratado, em tampão acetato de sódio 100 mM, pH 5, contendo cisteína e EDTA, ambos a 5 mM. Após incubação, os PSs foram precipitados com cloreto cetilpiridinio-CCP 10% (24 h; 25°C), lavados com CCP 0,05% e dissolvidos em solução de NaCl 2 M:álcool comercial (100:15; v:v). Após precipitação em álcool comercial (4°C; 24h), os PSs foram lavados duas vezes com álcool 80% e outra com álcool comercial. Os resíduos foram re-digeridos para otimizar o rendimento que foi calculado com base na matéria-prima inicial. A metacromasia foi avaliada usando azul-dimetilmetileno. O padrão e a densidade de cargas foram examinados por eletroforese em gel de agarose 0,5% usando condroitim sulfato, dermatam sulfato e heparina como padrões. A análise microscópica revelou sete camadas celulares, cujo arranjo periférico mostrou células corticais pigmentadas, circulares e numerosas, enquanto células ovais ou retangulares, incolores ocorreram em camadas internas. A metacromasia dos PSs corroborou com o rendimento na ordem de 17,70; 6,16; 4,66 e 1,52% para as quatro digestões seqüenciais realizadas, respectivamente, totalizando 30,04% a partir da alga desidratada. Na eletroforese, o perfil físico-químico apresentou PSs polidispersos migrando como heparina, porém o grau de densidade de cargas decresceu ao longo da técnica. Portanto, a disponibilidade e o caráter aniônico de PSs variam no decorrer da matriz de L. variegata.Publicado
2019-01-14
Edição
Seção
XXXVII Encontro de Iniciação Científica
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