CARACTERIZAÇÃO CITOTÓXICA DE HIDROXAMATOS: PREDIÇÃO DE TRANSCRITOS HDAC COMO ETAPA ANTECESSORA A MODULAÇÃO EPIGENÉTICA

Resumo

Comumente, alterações no epigenoma são constatadas em diversas linhagens tumorais, podendo ser estas responsáveis pelo desenvolvimento e progressão de alguns tipos de câncer. Este trabalho objetiva avaliar a sensibilidade de linhagens celulares in vitro a diferentes hidroxamatos sintéticos, possíveis inibidores de histonas desacetilases (HDAC). O método para avaliação da citotoxicidade e seletividade utilizado foi o do MTT. Três moléculas foram avaliadas. Em caráter molecular, observou-se os perfis de expressão gênica endógenos in silico das HDAC 1, 2, 3 e 6 em duas linhagens através da plataforma ProteinAtlasHuman. Adicionalmente, realizou-se o desenho de primers in silico e teste in vitro para a avaliação da expressão de transcritos de HDAC em linhagens pré-tratadas com os compostos, por meio da técnica de qPCR. Os compostos testados obtiveram percentual de inibição maior que 75% nas linhagens HCT116, PC3 e SF295, as moléculas apresentaram melhores valores de IC50 e seletividade na linhagem HL60, destacando-se o composto HDX566 que apresentou IC50 <2,5 µM e índice de seletividade >2. Dentro do modelo de predição avaliado, constatou-se diferentes níveis de expressão endógena para as HDAC analisadas, o que fornece um parâmetro para a observação do potencial modulatório desses transcritos quando tratados com os compostos em relação as enzimas alvo avaliadas. Dentre os primers desenhados, foram escolhidos aqueles com os melhores resultados para síntese e, posteriores testes in vitro. Dentre os quatro pares de primers desenhados, apenas dois pares amplificaram nas condições testadas (HDAC 1 e 3). Portanto, o estudo evidencia três moléculas com potencial citotóxico e seletivas, aptas a serem testadas para a determinação da modulação de transcritos HDAC e posterior avaliação do efeito a nível epigenético. O presente trabalho contou com apoio e financiamento do CNPq.