Avaliação dos efeitos do óleo essencial de Lippia sidoides e do timol durante o cultivo in vitro de folículos pré-antrais inclusos no tecido ovariano de bovinos

Resumo

O cultivo in vitro de folículos ovarianos pré-antrais bovinos pode contribuir para aumentar a disponibilidade de oócitos aptos a subsidiar a produção in vitro de embriões. No entanto, o desenvolvimento in vitro desses gametas enfrenta limitações como a ocorrência de estresse oxidativo durante o cultivo. Por esse motivo, a suplementação do meio de cultivo com substâncias antioxidantes como os óleos essenciais têm sido proposta. Com esse propósito, o óleo essencial de Lippia sidoides e seu componente majoritário Timol apresentam-se como excelentes alternativas. Estudos anteriores com essa espécie identificaram a presença em seu óleo essencial de flavonoides, quinonas e triterpenos, lignanas, esteroides livres e glicosilados e ácidos orgânicos, moléculas com importante ação antioxidante. Contudo, ainda são desconhecidos os efeitos desses compostos durante o desenvolvimento in vitro de folículos ovariano pré-antrais inclusos no tecido ovariano de bovinos. Assim, esta proposta tem como objetivo avaliar os efeitos da adição de diferentes concentrações do óleo essencial de Lippia sidoides ou do Timol durante o cultivo in vitro de tecido ovariano bovino. Para isso, tecido ovariano proveniente de ovários bovinos, será cultivado durante 6 dias na presença do óleo essencial de Lippia sidoides (3.200, 1.600, 800, 400 μg/mL) ou do Timol (3.200, 1.600, 800, 400 μg/mL). As condições de cultivo serão a 38,5ºC e 5% CO2 em ar. Após o cultivo, o tecido será avaliado por histologia clássica; coloração com Picrosirius red e microscopia eletrônica de transmissão com objetivo de verificar a viabilidade dos folículos e do tecido. Os dados serão avaliados estatisticamente através do software GraphPad Prisma (5.0) e as diferenças serão consideradas significativas quando P<0,05. Espera-se que esses compostos possam contribuir para a ativação e desenvolvimento folicular mantendo a morfologia celular adequada, preservando a integridade da matriz extracelular e a densidade estromal adequada.