INFLUÊNCIA DA MELATONINA SOBRE A ATIVIDADE MITOCONDRIAL DE OÓCITOS BOVINOS MATURADOS IN VITRO

Resumo

A mitocôndria é a organela chave da maquinaria metabólica, responsável por fornecer energia que é consumida durante o processo de maturação, sendo considerada o principal gerador de radicais livres em mamíferos. O excesso de radicais livres como as espécies reativas de oxigênio (EROS) durante as biotécnicas de reprodução assistida incluindo a maturação in vitro (MIV), pode ocasionar estresse oxidativo levando a danos nas organelas celulares e consequentemente ocasionando apoptose celular. Assim, substâncias antioxidantes que possam minimizar esses danos têm sido adicionadas aos meios de cultivo. Dentre elas, destaca-se a melatonina, um hormônio que exibe efeitos imunomoduladores, citoprotetores, além de ser um potente antioxidante contra EROS. Desta forma, o presente estudo objetivou investigar a ação da melatonina sobre a atividade mitocondrial durante a MIV de oócitos bovinos. Inicialmente, complexos cúmulos oócítos (COC) foram pré-maturados em meio TCM (controle) com forskolin + peptídeo natriurético do tipo-C durante 8 h, 38,5 ° C, com 5% de CO2. Após a pré-maturação, os COC foram maturados na presença de diferentes concentrações de melatonina (0, 10 -6; 10 -7 e 10 -8 M). Ao final da MIV, os oócitos foram recuperados e corados para avaliação mitocondrial utilizando a sonda Mitotracker Red. A intensidade da fluorescência foi medida usando o software Image J (versão 1.46; National Institutes of Health, Bethesda, MD). Os dados obtidos foram comparados usando o teste t de student, e as diferenças foram consideradas significativas quando p<0,05. Os COC maturados com a melatonina e no controle apresentaram mitocôndrias com distribuição periférica. Além disso, foi observado um maior índice de intensidade de fluorescência com a melatonina 10 -7 e 10 -8 M quando comparado ao controle. Em conclusão, a adição de melatonina ao meio MIV, melhora as taxas de mitocôndrias ativas em oócitos bovinos maturados in vitro.