DESVENDANDO A FUNÇÃO DO SISTEMA TIORREDOXINA MITOCONDRIAL NA REGULAÇÃO DO CICLO TCA DE ARABIDOPSIS THALIANA SOB CONDIÇÕES DE LUZ E ESCURO

Resumo

O ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) tem importante papel no metabolismo vegetal, por ser acoplado à síntese de ATP e por fornecer carbono para inúmeras rotas metabólicas. Assim, entender como o ciclo TCA é regulado fornece importantes informações sobre o funcionamento da célula vegetal. Evidências indicam que enzimas deste ciclo são reguladas por tiorredoxinas (TRXs) e TRXs redutases dependentes de NAPDH (NTR) localizadas na mitocôndria. Ademais, sabe-se que a respiração vegetal é inibida na luz. Porém, não está claro como a luz afeta a regulação das enzimas do ciclo TCA via TRX/NTR. Neste sentido, para desvendar a influência do sistema TRX/NTR na regulação do ciclo TCA sob luz e escuro, utilizamos plantas de Arabidopsis thaliana selvagem (WT) e os mutantes trxo1-1, trxh2-2 e ntra ntrb. Folhas destes genótipos foram submetidas à luz ou escuro por 0, 30, 60 min. Após, as folhas foram congeladas em N2 liquido e metabólitos foram extraídos, detectados via GC-MS, identificados via o software Xcalibur e analisados utilizando a plataforma MetaboAnalyst. Foi observado uma diminuição nos níveis de fumarato no mutante ntra ntrb sob escuro, quando comparado com WT. Os níveis de piruvato aumentaram nos mutantes no escuro, quando comparado aos mesmos genótipos sob luz. Em contrapartida, o genótipo WT exibiu comportamento oposto. Houve quantidade elevada do succinato apenas no mutante ntra ntrb, sob escuro, mostrando uma regulação diferenciada em relação aos demais. Enquanto isso, houve aumento de malato em trxo1-1 e trxh2-2 sob luz e diminuição em ntra ntrb. Análise multivariada sugere que as diferenças entre os mutantes e o genótipo selvagem é observado principalmente sob luz. Assim, os dados indicam a importância da luz na regulação do ciclo TCA mediado pelo sistema TRX/NTR. Análises complementares serão desenvolvidas afim de verificar a importância do sistema TRX/NTR no controle do fluxo metabólico através do ciclo TCA.