IMOBILIZAÇÃO DE β-GALACTOSIDASE EM CROSS-LINKED ENZYME AGGREGATES (CLEA) MAGNÉTICOS PARA PRODUÇÃO DE DERIVADOS DA LACTOSE

Resumo

Na indústria alimentícia, os biocatalisadores têm se mostrado uma escolha recorrente para o desenvolvimento de produtos de alto valor agregado e alimentos para pessoas com restrições alimentares, devido a sua alta capacidade catalítica, especificidade reacional e baixa demanda energética. Visando suprir essa demanda, o objetivo deste trabalho é a obtenção de β-galactosidase imobilizada, que seja reutilizável, estável e eficiente na hidrólise de lactose, tanto para a formação de produtos destinados a pessoas intolerantes a este carboidrato, quanto para a utilização em associação a outras enzimas a fim de produzir adoçantes não glicêmicos, como a tagatose. Para este fim, foi realizada a produção de cross-linked enzyme aggregates (CLEA) magnéticos de β-galactosidase a partir da precipitação da enzima, adição de nanopartículas magnéticas (MNP) funcionalizadas com 3-aminopropiltrietoxissilano e reticulação. Para os agregados formados, avaliou-se atividade enzimática, taxa de conversão de lactose em galactose por tempo e estabilidade térmica a 60 °C, um dos parâmetros industriais mais relevantes para biocatalisadores. Estudou-se o agente reticulante do processo utilizando-se diferentes volumes de glutaraldeído, que já é bastante utilizado em experimentos de reticulação, e dextrana poli aldeído, a fim de avaliar qual o mais adequado para obter melhores parâmetros na produção de CLEA. A eficiência da reticulação seguiu uma tendência crescente junto ao volume de glutaraldeído utilizado, e foi maior para a dextrana poli aldeído. Os resultados dos ensaios de estabilidade térmica mostraram a ausência de diferenças significativas entre os CLEA formados, ainda que tenham apresentado diferenças nos tempos de meia-vida. Os dados obtidos reforçam a necessidade de incrementar a qualidade desses agregados, trabalhando no aprimoramento de sua estabilidade, para tornar viável a utilização destes em processos industriais. Agradeço ao CNPq e à CAPES, que tornaram este trabalho viável.