Green fluorescent proteins as natural antioxidants: a study on Protopalythoa variabilis (Duerden, 1898) and Zoanthus sociatus (Ellis, 1768)
Palavras-chave:
Coral mole. Purificação de proteínas. Atividade antioxidanteResumo
A superfamília das proteínas fluorescentes verdes (GFP) abrange uma classe de proteínas fluorescentes e não fluorescentes amplamente estudadas em bioquímica e biologia celular. Apesar das pesquisas significativas, as funções fisiológicas das GFPs permanecem pouco compreendidas. Neste estudo, duas novas proteínas fluorescentes verdes (GFPs) foram isoladas dos corais moles Protopalythoa variabilis e Zoanthus sociatus, denominadas PvarGFP e ZsocGFP, respectivamente. A purificação foi realizada por meio de uma combinação de cromatografia de interação hidrofóbica, troca iônica e exclusão por tamanho. Ambas as proteínas foram identificadas como monômeros de aproximadamente 27 kDa em condições desnaturantes, independentemente da presença ou ausência de agentes redutores. No entanto, a cromatografia de exclusão por tamanho revelou que a PvarGFP adota uma conformação dimérica, enquanto a ZsocGFP forma um tetrâmero. A análise de sequenciamento de aminoácidos indicou que a PvarGFP possui alta similaridade com GFPs de outras espécies de cnidários, enquanto a ZsocGFP está mais próxima de uma proteína fluorescente vermelha (RFP) de Zoanthus sp. A análise de dicroísmo circular mostrou que a estrutura secundária da PvarGFP é predominantemente em conformação β, com excepcional estabilidade térmica, mantendo sua estrutura até 70 °C. Além disso, a PvarGFP demonstrou forte atividade antioxidante, com capacidade eficaz de neutralizar radicais livres e inibir a oxidação do β-caroteno. Esses achados sugerem um potencial papel da PvarGFP como antioxidante natural, contribuindo para a defesa do coral contra o estresse oxidativo.
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